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2024-12-30 - 来源：中科检测
细菌回复突变试验（BacterialReverseMutationTest），通常也被称为Ames试验（AmesTest），是一种用来检测化学物质是否具有致突变性（即引起基因突变的能力）的体外试验方法。该试验广泛应用于评估新化学物质（如药物、食品添加剂、农药、化妆品成分等）的致突变潜力。
细菌回复突变试验方法
1、预实验：
对未知或怀疑对试验菌株有抑制作用的试验样品，应进行预实验。在有或无代谢活化的情况下，用回复突变的菌落数来评估样品是否有细胞毒性。如有抑制作用，则需对试验样品进行梯度稀释，直至找到无细胞毒性的浓度范围。
2、主试验：
使用移液器将冷冻保存的菌株培养物接种于营养肉汤培养基中，在恒温培养箱中培养至对数增长期。然后，将融化好的顶层培养基分装于无菌小试管中，并加入试验菌株的新鲜菌液、试验样品浸提液（或阴性、阳性对照液）以及代谢活化剂（如需要）。
轻轻混匀后，迅速将此混合物倒入已经固化的底层培养基平皿中，转动平皿使顶层培养基均匀分布，并平放固化。最后，将平皿倒置于恒温培养箱中培养一定时间（通常为48-72小时）。
3、观察与记录：培养结束后，计数并记录每个平皿的菌落数。根据菌落数的增加情况来判断受试样品是否具有致突变性。
细菌回复突变试验标准
GB15193.4-2014食品安全国家标准细菌回复突变试验
GB/T15670.14-2017农药登记毒理学试验方法第14部分：细菌回复突变试验
GB/T21786-2008化学品细菌回复突变试验方法
YY/T0870.1-2013医疗器械遗传毒性试验第1部分：细菌回复突变试验
细菌回复突变试验观察终点
观察终点是回复突变菌株的生长情况，即菌落数的增加。
如果受试样品导致试验菌株的菌落数显著增加，超过了阴性对照组的自发回复突变菌落数范围，并且这种增加在至少一个或多个浓度条件下具有可重复性和统计学意义，则认为受试样品具有致突变性。
阳性对照组的菌落数应与阴性对照组菌落数存在显著性增加，以验证试验的有效性。
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