技术文章
新闻资讯
INFORMATION CENTER
新闻资讯 技术文章 细菌回复突变试验常用菌株及遗传终点分析
细菌回复突变试验常用菌株及遗传终点分析
  • 8次
  • 2024-12-30
  • 来源:中科检测

  细菌回复突变试验旨在研究细菌在不同环境条件下的突变现象,以及突变对细菌生存和适应能力的影响。通过该实验,可以更好地了解细菌的遗传变异机制,揭示突变对细菌进化和抗药性的重要作用。


  细菌回复突变试验范围


  食品添加剂:包括防腐剂、色素、香料等各类食品添加剂。


  化学品:包括各种有机化合物、无机化合物、金属离子等。


  环境样品:包括水、土壤、空气等各种环境样品。


  医药制品:包括药物、医疗器械等各类医药制品。


  细菌回复突变试验常用菌株


  该试验通常使用几种常见的突变菌株,其中最常用的是沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)和大肠杆菌(Escherichiacoli)。


  这些菌株的野生型(wildtype)即原养型(prototroph)菌株能够自行合成组氨酸(histidine)或色氨酸(tryptophan)等必需氨基酸,但试验所使用的测试菌株(testerstrain)为其突变体(mutant),是营养缺陷型(auxotroph),不能自行合成这些氨基酸。


  在相应营养物缺乏的培养基中,这些突变菌株不能生长,但如果受试物具有致突变性并诱导了回复突变,则这些菌株将能够重新获得生长能力。


  细菌回复突变试验遗传终点


  Ames试验的遗传终点是DNA碱基序列的改变‌。


  Ames试验利用特定类型的突变菌株,这些菌株携带有特定的基因突变,导致它们不能在没有外源性营养物质的培养基中生长。


  当这些菌株暴露于测试化合物时,如果该化合物具有致突变性,它会诱导这些突变菌株产生基因回复突变,使其重新获得在无外源性营养物质的培养基上生长的能力。通过检测这些回复突变菌株的生长情况,可以评估化合物的致突变性‌。


  细菌回复突变试验方法步骤


  准备培养基:在选择性培养基(不含特定的营养物质)上涂布含有突变菌株的培养物。该培养基通常不含组氨酸(用于沙门氏菌)或色氨酸(用于大肠杆菌)。


  暴露于化合物:将测试化合物和一种代谢激活系统(通常是来自大鼠肝脏的S9混合物)加入培养基中。S9混合物用于模拟体内代谢过程,评估化合物的代谢产物是否具有致突变性。


  培养与观察:将培养皿置于适宜的温度下培养48~72小时,然后观察和计数回复突变菌落的数量。